Microscopie Electronique à Balayage
FEG Hitachi REGULUS 8230 (2020)
Source d’électrons = effet de champ à cathode froide
Résolution théorique = 1nm
Grandissement x30 à x2 000 000
Détecteurs = SE, BSE (chambre et in lens), STEM BF et DF, EDS
Equipements annexes = Cryoplatine Quorum et logiciel Mirror CLEM
MEB Low Vacuum JEOL 6060 LV (2004)
Source d’électrons = filament tungstène
Résolution théorique = 4nm
Grandissement x30 à x300 000
Détecteurs = SE, BSE (chambre)
Platine Peltier -20°C
Etude de surface
Les échantillons biologiques sont fixés chimiquement, déshydratés et métallisés. Les autres échantillons sont simplement métallisés si non conducteurs.
Les électrons secondaires permettent d’étudier la surface des échantillons et les électrons rétrodiffusés apportent des informations sur leur composition chimique.
Photo = Klebsiella pneumoniae (LMGE C.Forestier)
Imagerie STEM
Observation à 30kV de coupes ultrafines ou de colorations négatives sur grilles. Cette imagerie est proche du TEM avec possibilité de contrastes Bright Field ou Dark Field.
Photo = marquage de la myosine du muscle de rat selon la technique de Tokuyasu (Equipe QUAPA INRAe_T. Astruc)
Microanalyse X
Le détecteur EDS récolte les photons X et détermine leurs énergies permettant l’établissement de spectres spécifiques de la composition chimique de l’échantillon et une semi-quantification des éléments présents. Le détecteur Ultim Max 170mm² combine une grande taille de capteur avec une électronique puissante pour offrir une vitesse et une sensibilité inégalées.
Photo = analyse d’une coupe MET de cellules contenant des nanoparticules d’or de 10nm. Résultat d’un pointage sur une nanoparticule. (LPC_P. Vernet)
Cryo MEB
Les échantillons sont congelés (azote pâteux ou HPF) et observés à basse température (-140°C) afin de conserver leur structure native (état hydraté des végétaux ou lipides par ex).
Ils peuvent également être cryofracturés pour observer leur structure interne.
Photo = cryofracture de complément alimentaire et mesure de microgouttelettes d’huile (ADISSEO_ B. Daffis)
Métalliseur/Evaporateur carbone/Glow discharge Q150 TES plus Quorum (2021)
La métallisation permet de rendre conducteur les échantillons avant une observation au MEB
L’évaporation carbone a le même rôle et protège les coupes ultrafines avant une observation au MET
Le glow discharge est utilisé sur les grilles support du MET pour faciliter le dépôt de suspensions ou de coupes ultrafines
Point critique K850 Emitech (2004)
Il permet de déshydrater des échantillons sans tension de surface avant leur observation au MEB
Photo = Métallisation au chrome Quorum Q150 (2021)